Югорский центр нанотехнологий

Методика качественной оценки морфофункциональной активности тромбоцитов

Концентрат тромбоцитов - это компонент крови, входящий в стандартные протоколы лечения тромбоцитопений различного генеза, в первую очередь, в онкологической и гематологической клинике. Под протекцией донорских тромбоцитов проводится трансплантация аллогенного или родственного  костного мозга, высокодозная химиотерапия, лучевая терапия. В современных условиях качество заготовленного донорского тромбоконцентрата оценивается в основном по концентрации тромбоцитов в единице объема. Однако, прогноз течения заболевания и его исход зачастую зависит от функциональной полноценности кровяных пластинок и их потенциальной возможности запускать каскад реакций свертывания крови.

Атомно-силовая микроскопия (АСМ) может стать простым и надежным методом качественной оценки морфофункциональной активности тромбоцитов в производственной трансфузиологии. Для практического применения нами разработана методика приготовления проб для микроскопирования. Методика основана на получении тромбоконцентрата  и фиксации клеток метанолом на стекле.

Нами показано, что на основе простых способов пробоподготовки можно получать АСМ-изображения как большого числа тромбоцитов, так и отдельных агрегатов, и использовать их АСМ-изображения для качественной оценки морфофункциональной активности этих клеток. АСМ-изображения тромбоцитов имеют значительно большее разрешение, чем изображения клеток, получаемые с помощью методов световой микроскопии. Эффективность применения атомно-силовой микроскопии в клинической практике продемонстрирована на примере оценки морфофункциональной активности тромбоцитов в донорском тромбоконцентрате в начале и конце срока его хранения.

АСМ-изображение тромбоцитов, фиксированных на стекле метанолом. а - для приготовления образца использовался тромбоконцентрат первых суток хранения. б - срок хранения тромбоконцентрата составляет пять суток. СЗМ Solver PRO.

АСМ-изображение тромбоцитов в стадии дегрануляции. СЗМ Solver PRO.

Предлагается использовать методику качественной оценки морфофункциональной активности тромбоцитов в производственной трансфузиологии.

Видеокомпьютерный комплекс для работы с микроскопом в клинической лаборатории

В клинических лабораторных исследованиях используются видеокомпьютерные комплексы для изучения изображений получаемых с помощью световой микроскопии. Примерами таких разработок являются: программный комплекс для работы с изображением AxioVision 4 ООО "Карл Цейсс"; программное обеспечение для роботизированного комплекса медицинской микроскопии МЕКОС-Ц2 ЗАО "Медицинские компьютерные системы», г. Москва и другие. Высокая стоимость таких комплексов делает их недоступными для большинства клинических лабораторий бюджетных медицинских учреждений округа. Кроме этого, сотрудникам клинических лабораторий необходимо проходить курс специального обучения с отрывом от производства.

Проанализировав, содержание повседневной работы врача-лаборанта клинической лабораторной диагностики мы установили следующее:

• наиболее актуально применение видеокомпьютерного комплекса в гематологических исследованиях;
  
• востребованы on-line консультации по вопросам интерпретации данных микроскопических исследований;
  
• необходима компьютерная программа для счета клеток, составления протокола и выдачи списка референтных значений.

С четом этих потребностей нами был скомпонован прототип недорого видеокомпьютерного комплекса для гематологических исследований в клинических лабораториях округа. Комплект оборудования включает:

• цифровую фото-видеокамеру DCM500 легко присоединяемую к тубусу любого тринокулярного или бинокулярного микроскопа (рисунок 1);
  
• персонального компьютера;
  
• средства связи для выхода в Интернет по технологии GPRS-EDGE либо 3G;
  
• компьютерную программу для подсчета клеток крови и создания протоколов с результатами исследований (рисунок 2).
  

Невысокая стоимость комплекса делает его доступным для приобретения медицинскими учреждениями с низким бюджетом, врачами-лаборантами, а так же для учебных целей.